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        下面就是多功能酶標儀的免疫吸附試驗的基本原理解析

        更新時間:2022-06-30點擊次數:921
         
          多功能酶標儀即酶聯免疫檢測儀。是酶聯免疫吸附試驗的儀器又稱微孔板檢測器??珊唵蔚胤譃榘胱詣雍腿詣觾纱箢?,但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一個比色計,即用比色法來進行分析。測定一般要求測試液的終體積在250μL以下,用一般光電比色計無法完成測試,因此對酶標儀中的光電比色計有特殊要求。
          多功能酶標儀是我們生活中應用的非常廣泛的醫療設備,下面就是多功能酶標儀的免疫吸附試驗的基本原理講解:
          1、先將過量的特異抗體(或抗原)包被于載體(酶標板)上,通過抗原抗體反應使待側物質(抗原或抗體)和酶標記物(用HRP-辣根過氧化物酶標記的抗體或抗原)也結合在載體上(固相分離),經洗滌去除游離的酶標記物后,加入底物,已經結合在載體上的標記酶促使底物顯色。終利用光電比色法,對待測物進行定性判斷或定量測定。以上方法的檢驗靈敏度可以達到ng/ml水平。
          2、包被酶標板:將特異抗原溶液加入酶標板孔內,4℃過夜。然后用洗滌液洗滌3次到5次(洗板機洗板),這樣溶液中的特異抗原被牢固吸附在酶標板的微孔表面,形成固相抗原,殘液及雜質被清洗掉。
          3、加入被測樣本液(病人血清):樣本液中若含有待測抗體,經過溫育反應,則與已包被的抗原產生特異結合,生成包被抗原與待測抗體的復合物,被吸附在酶標板的微孔表面。然后再次進行洗滌,去除殘液及干擾物質。
          4、加酶結合物:經過溫育反應,生成包被抗原加待測抗體加酶標抗原的三者復合物,同樣被吸附在微孔表面,然后再次洗滌,去除游離的或非特異沾附的酶結合物(洗板)。
          5、加顯色液:經過10分鐘到20分鐘的顯色反應,被吸附的復合物中的酶與顯色底物液生成有色溶液。此時,由于游離或非特異吸附的酶已被清除,所以溶液顏色的深淺,僅決定于已與待測物結合的酶的量,因此能真實反映待測物的濃度。被固化的酶越多,顯色就會越深,這就說明待測物的濃度越大。
          6、加終止液:終止顯色反應。
          使用酶標儀檢驗:把完成顯色的酶標板放在酶標儀儀器上進行光電比色檢驗,儀器分別檢測空白孔、陰陽性對照孔、標準孔、質控孔和患者樣本孔的吸光度值,并自動按程序要求計算出患者樣本中待測物的濃度或進行定性分析。

        多功能酶標儀

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